淀粉含量檢測試劑盒 可見分光光度法

產(chǎn)品簡介

產(chǎn)品內(nèi)容：  

試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：液體20mL×1瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。

產(chǎn)品說明：  

淀粉是植物中糖的主要儲存形式，其含量測定對于評價食品營養(yǎng)價值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。利用80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖，采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量，即可計算淀粉含量。

需自備儀器和試劑：  

可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰、濃硫酸和蒸餾水。

操作步驟：  

一、淀粉提取：  

1、 稱取0.1g-0.2g樣品（建議稱取約0.1g樣本）于研缽中研碎，加入1mL試劑一，充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，常溫離心5min，棄上清，留沉淀。

2、 沉淀中加入0.5mL蒸餾水，放入沸水浴中糊化15min（蓋緊，以防止水分散失）。

3、 冷卻后，加入0.35mL試劑二，常溫提取15min，振蕩3-5次。

4、 加入0.85mL雙蒸水，混勻，3000g，常溫離心10min，取上清液待測。

二、測定操作：

1. 分管光度計預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至620nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 調(diào)節(jié)水浴鍋 至95度。

3. 工作液的配制：臨用前在試劑三中加入7.5mL蒸餾水后，緩慢加入42.5mL濃硫酸，不斷攪拌，充分溶解，待用。用不完的試劑4℃保存一周。

4. 樣本測定：取0.2mL樣本和1mL工作液至EP管中，95度水浴10min（蓋緊，放置水分散失），自然冷卻至室溫，在620nm波長下記錄測定吸光值A。

淀粉含量計算：

標準條件下測定的回歸方程為y = 5.872x - 0.0295；x為標準品濃度（g/mL），y為吸光值。

1、 按照蛋白濃度計算

淀粉含量（mg/mg prot）＝﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷(V1×Cpr) =0.17×(A+0.0295) ÷Cpr

2、 按樣本鮮重計算

淀粉含量（mg/g 鮮重）＝ ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷ (W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W

V1:加入反應體系中樣本體積，0.2mL；V2：加入提取液體積，1.7 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。

注意事項：  

1. 由于工作液具有強腐蝕性，請謹慎操作。

2. 若吸光值大于1，請將樣本用提取液稀釋后再測定，計算公式中乘以相應的稀釋倍數(shù)。

3. 提取液的配置：0.35mL試劑二+1.35mL水。用多少按照此比例配多少。

備注：以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
實驗圖Standard Curve for Starch Content Assay Kit

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